全文预览

第四章酶活力的测定

上传者:梦溪 |  格式:ppt  |  页数:23 |  大小:1439KB

文档介绍
的定义:在一定条件下,一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量。这样酶的含量就可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示,即 “U/g” 或 “U/mL” 。? 世界各地实际应用的酶活力单位的定义各不相同。同一种酶往往有几种不同的单位。? 例如,1IU=lμmol/min;1Kat = 1mol/sРР2.酶活力单位Р第六页,共23页РР张晓静 2009.09Р一、酶活力Р酶活力的测定要在最适条件下进行,即最适温度、最适pH、最适底物浓度和最适缓冲液离子强度等,只有在最适条件下测定才能真实反映酶活力大小。? 测定酶活力大小时,通常要求底物浓度足够大,测定底物浓度的变化在起始浓度的5%以内的速率,这样可以保证所测定的速率是最初速率。此结果能比较可靠地反映酶的含量。РР第七页,共23页РР张晓静 2009.09Р一、酶活力РР3.酶的比活力Р酶的比活力代表酶的纯度,通常用下式表示:? 酶比活力=[ 酶活力单位数(U) / 蛋白质量(mg) ]? 有时也采用每克(g)酶制剂或每毫升(mL)酶制剂含有多少个活力单位来表示。? 比活力的大小可用来比较每单位质量蛋白质的催化能力。比活力是酶学研究及生产中经常使用的指标。Р第八页,共23页РР张晓静 2009.09Р二、酶活力的测定РР1.酶活力的测定步骤Р要求酶活力的测定方法:快速、简便、准确。Р酶活力测定均包括两个阶段:首先要在一定的条件下,酶与其作用底物反应一段时间,然后再测定反应液中底物或产物变化的量。Р第九页,共23页РР张晓静 2009.09Р二、酶活力的测定Р酶活力?的测定步骤Р① 底物Р② 反应条件Р③ 反应时间Р④ 底物或产物?变化量РР选择底物?配制底物溶液Р确定酶促反应条件:pH、温度等Р准确计时并终止反应Р运用各种检测技术,快速、简便、准确的测定变化量Р第十页,共23页

收藏

分享

举报
下载此文档