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生化实验04淀粉酶活性的测定陈桃

上传者:业精于勤 |  格式:ppt  |  页数:16 |  大小:2350KB

文档介绍
还原端残基Р两个葡萄糖单位之间的1,6-糖苷键Р两个葡萄糖单位之间的1,4-糖苷键Рa -淀粉酶? β-淀粉酶切α-1,4-糖苷键? 淀粉的水解麦芽糖酶? 酶促脱支酶切α-1,6-糖苷键? 降解异麦芽糖酶? ? 磷酸解: 淀粉磷酸化酶Р2、淀粉的酶促降解Р3. 淀粉的酶促水解Р淀粉酶? α-淀粉酶:在淀粉分子内部任意水解α-1,4糖苷键。产物为麦芽糖,麦芽三糖,糊精等还原糖(内切酶)Р β-淀粉酶:从非还原端开始,水解α-1,4糖苷键,依次水解下一个β-麦芽糖单位(外切酶)Рα-淀粉酶Рβ-淀粉酶Р极限糊精Рα-淀粉酶β-淀粉酶? 可跨越分枝点不能跨越分枝点? 内切酶(随机切) 端解酶(非还原端两两相切)? 产物糊精分子量小糊精分子量大(极限糊精)? 耐70℃ 15min, 不耐酸耐pH=3.3 酸性, 不耐高温? 分布发芽种子休眠种子Рα-淀粉酶和β-淀粉酶的异同点:Р相同点:都作用于α-1,4糖苷键,产物都是麦芽糖Р不同点:Р淀粉酶活性的测定(P174)Р实验04Р一、目的?二、原理Р淀粉Рα-淀粉酶(内切酶)Рβ-淀粉酶(外切酶)Р麦芽糖等寡聚糖Р麦芽糖Р3,5-二硝基水杨酸Р3-氨基-5-?硝基水杨酸?(棕红色)Р淀粉酶的作用机制及产物显色原理:РD-麦芽糖Р淀粉酶活性大小的表示方法:?淀粉酶活性的大小与产生的还原糖的量成正比。以单位质量样品单位时间生成的还原糖的量表示。Р测定α-淀粉酶和β-淀粉酶:?α-淀粉酶不耐酸, β-淀粉酶不耐热,本实验采用70。C保温15min钝化β-淀粉酶而测出α-淀粉酶。总活力减去α-淀粉酶活力则为β-淀粉酶活力。Р三、材料、仪器设备及试剂Р材料:萌发的小麦种子(芽长1cm)?仪器设备:分光光度计、恒温水浴、刻度试管、? 容量瓶?试剂:? 1、标准麦芽糖溶液(1mg/mL)? 2、3,5-二硝基水杨酸(含NaOH)? 3、1%淀粉溶液

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