酶活力单位万义、溶液摇匀在振摇下精密滴加摇匀室温放置分钟另取具塞为供试品的平均吸收度为酪氨酸对照品的平均吸收度一一哑瞻支精密加酸液水与液为样品的称取最摇匀在振摇下精密滴加试剂摇匀为在上述规定的浓度及稀释倍数的固于室温放置分钟作空白对照用分光光度定的条件换算所得值计在的波长处分别测定吸收度为及并求得平均值丈实验结果和讨论计算一实验结果表不同对酶活力助的影响批号表不同温度对酶活力灼影响批号℃℃℃℃魂℃℃雌理℃℃堵肠即和日尹反应时间分图酶促反应的时间对其活力的影响二讨论由图实验结果表明酶促反应的时间由于随着反应时间的延长底物逐渐被作用而越来趋于平衡使吸收值万不再升高所以应在此线性范围二级反应的时间内终止反应进行显色本试验设计底物与酶浓度作用在分钟左右线性最好约在加分钟时终止反应而显色由表实验结果表明本反应的最适温度为℃℃以上蛋白变性酶失活但人体内的许多酶都在℃左右进行故本实验采用了℃℃对测定结果无影响从表一结果看出本试验在时是酶作用的最适附在议其活力很低在以上不表现酶活力在进行比色分析时加试剂时间宜控制在秒左右加完边加边摇若加卫试剂的时间过长会使结果偏低另外显色反应与放置时间和温度有关因此每次实验供试液与酪氨酸对照液必须在一定条件下平行操作以减少实验误差胃蛋白酶与其底物的浓度必须适量若酶浓度过高由于底物已被其作用掉而使吸收值难以达到预计的峰值使结果偏低浓度过低吸收值很小会给测定带来较大的误差若底物浓度过低不能与酶充分作用浓度过高时由于酶浓度在一定的时间内它只能作用于一定量的底物而失去意义所以取样量要按估计单位计算使侧定吸光度与酪氨酸对照液的吸光度相当并控制在左右若样袱的值与对照液的值相差太大应重新调整榷度后进行测定? 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
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