酪蛋白的制备实验报告

蛋白的制备实验报告)剂 1、95%乙醇1200mL2、无水乙醚1200mL3、/L醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml先配A液与B液 A液:/L醋酸钠溶液称NaAC?3H2O,定容至XXml。 B液:/L醋酸溶液,称优纯醋酸定容至XXml。取A液1770ml,B液1230ml混合即得的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。4、乙醇——乙醚混合液乙醇:乙醚=1:1器具 1、离心机2、抽滤装置3、精密pH试纸或酸度计4、恒温水浴箱5、烧杯四、操作步骤酪蛋白的粗提 10mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、的醋酸缓冲液10mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至。将上述悬浮液冷却至室温。离心8-10分钟。弃去清液,得酪蛋白粗制品。酪蛋白的纯化 1、用水洗涤沉淀3次,离心5分钟,弃去上清液。 2、在沉淀中加入20mL乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次,抽干。3、将沉淀摊开在表面皿上,风干;得酪蛋白纯品。准确称重,计算含量和得率。含量=酪蛋白g/10mL牛乳得率=﹝测得含量/理论含量﹞X100%式中理论含量为/100mL牛乳。五、注意事项 1、由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质,故调节牛奶液的等电点一定要准确。最好用酸度计测定。 2、精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂,最好在通风橱内操作。 3、目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品,不是纯净牛奶,所以计算时应按产品的相应指标计算。六、实验报告 1、根据实际操作,以流程图形式总结酪蛋的制备方法。2、合理分析实验所得率七、思考题 1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么?2、试设计另一种提取酪蛋白的方法? 琼州学院实验项目卡生物科学与技术学院生化实验室设日期___年__月__日实验教师签名______________________实验员签名______________