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紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告

上传者:似水流年 |  格式:docx  |  页数:3 |  大小:35KB

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002Р270Р0.329Р215Р2.829Р375Р-0.002Р320Р0.003Р265Р0.278Р210Р2.584Р370Р-0.002Р315Р0.004Р260Р0.23Р205Р2.103Р365Р-0.001Р310Р0.007Р255Р0.188Р200Р0.648Р360Р-0.002Р305Р0.013Р250Р0.184Р195Р0.443Р355Р-0.001Р300Р0.031Р245Р0.275Р190Р0.384Р350Р-0.001Р295Р0.078Р240Р0.65Р---Р---Р图1吸收曲线Р 在上图吸收曲线中可以看到有两处吸收峰,且在波长225nm处的吸收峰远大于280nm处,这是由于在波长250nm以下时,溶剂吸收较为严重,干扰较大,所以,蛋白的最大吸收波长应为280nm。Р表2绘制标准曲线的相关数据Р浓度c/mol·L-1Р0.3Р0.45Р0.6Р0.75Р0.9РAbsР0.217Р0.297Р0.408Р0.51Р0.591Р图2标准曲线Р表3标准曲线(y=ax+b)的相关数据РaРbРR2Р0.6407Р0.0202Р0.9969Р将试样所测得吸光度带入标准曲线中求蛋白质含量:Р稀释以后的蛋白质的浓度 cx=(Abs-0.0202)/0.6407Р原试样中蛋白质浓度 c=(cx*10)/2Р表4计算结果РAbsР0.310Р0.285Р0.283Рcx/mg·mL-1Р0.4523Р0.4132Р0.4101Рc/mg·mL-1Р2.261Р2.066Р2.051Р平均值`c/μg·mL-1Р2.126Р|c-`c|/μg·mL-1Р0.135Р0.060Р0.075Р所测蛋白质试样的浓度约为2.126mg·mL-1.Р单次测定的标准偏差:Рs =Р=Р=0.12Р相对标准偏差: sr =×100% ==5.5%

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