Р菌落计数Р如果怀疑样品中含有在培养基表面蔓延生长的菌落,待琼脂凝固后,在其上覆盖一层(4mL)水琼脂。Р平板叠放不超过6个РISO4833-2003菌落计数方法Р选择连续2个稀释度不超过300CFU的平板,且一个平板至少含15CFU进行计数,计算公式如下:? N=∑C/(n1+0.1*n2)*d?所有平板的菌落数都不足15CFU,计算2平板菌落的算术平均值m,液体样品:NE=m? 固体样品: NE=m×d-1?无菌生长:液体样品:less than 1; 固体样品:less than 1 ×d-1?最终结果保留前两位有效数字。Р菌落总数测定几点说明Р由于检样中采用30/35℃有氧条件下培养,因而并不是样品中实际的总活菌数,一些特殊营养要求的细菌、厌氧菌、微需氧菌、以及非嗜中温细菌,均难以反映出来。?鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数,而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位(colony forming units,CFU)报告。Р菌落总数测定几点要求Р每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过15min,主要为防止细菌增殖和产生片状菌落。样液与琼脂应充分混合,避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。皿内琼脂凝固后,不要长时间放置,然后倒置培养,可避免菌落蔓延生长。?检样过程中应用稀释剂做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。同时,检样过程中应在工作台上打开一块空白平板计数琼脂,其暴露时间应与检样时间相当,以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。?检样稀释液有时带有食品颗粒,为避免与细菌菌落发生混淆,可作一检样稀释液与平板计数琼脂混合的平皿,不经培养,于4 ℃放置,以便在计数检样时用作对照。
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