实验四--食品中大肠菌群的测定PPT

样品做连续的10倍稀释,选择3个连续的10倍稀释液,每种稀释液接种3管装有培养基的试管中培养,根据LST初发酵试验以及BGLB发酵证实实验,证实大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每g(mL)样品中大肠菌群的最可能数。?食品中大肠菌群数以每g(mL)样品中大肠菌群的最可能数来表示,即为大肠菌群MPN值。Р三、实验器材Р(一)培养基? 月桂基硫酸盐蛋白胨肉汤(LST)培养基? 煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)培养基?(二)实验材料? 市售饮料?(三)其他? 三角瓶,试管,培养皿,移液管?(四)仪器? 超净工作台,电子天平,高压蒸汽灭菌锅Р四、实验准备Р(一)配制培养基和试剂(以中央台为单位)? 1、配制生理盐水:1000mL? NaCl 8.5g 水 1000mL? 分装:?3个三角瓶(含玻珠)中,225mL/个?9支试管,3支/组,9mL/支? 灭菌:? 121~126℃灭菌20minР3、煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)培养基:150mL?分装到12个已装有杜氏小管试管中,10mL/个?包扎,112~115℃灭菌30min? 蛋白胨 1.5g 乳糖 1.5g? 牛胆粉溶液 30mL 0.1%煌绿水溶液 2mL ? 水 150mL pH 7.2?牛胆粉溶液制法:将3g牛胆粉溶于30mL水中,调pH至7.0~7.5?BGLB制法:先将蛋白胨、乳糖溶于约100ml水中,加入牛胆粉溶液30mL,调节pH,再加入0.1%煌绿水溶液,最后用水补足到150ml,用纱布过滤后,再分装到试管中。Р(二)其它器具(每个组准备)? 移液管 10mL 1支/组? 1mL 10支/组Р五、实验步骤Р1、样品处理:? 以无菌操作,先用酒精棉球擦拭样品表面,用无菌剪刀将包装剪破,量取检样25mL放入225mL灭菌生理盐水当中,充分振荡,混合均匀,制成10-1稀释度样品?2、梯度稀释法依次稀释样品到10-4