验: 1)两步法进行了两次乳糖发酵试验。初发酵和证实实验所用培养基不同,但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义,即“在37℃分解乳糖产酸产气”。 LST 中提供了磷酸盐缓冲体系,氯化钠可维持渗透压,月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群的生长,这个缓冲蛋白胨乳糖肉汤允许“缓慢乳糖发酵( Slow lactose fermentations )”来促进菌体产气。 BGLB 中胆盐和煌绿可以抑制革兰氏阳性细菌和除了大肠菌群的很多革兰氏阴性细菌。 2)初发酵阳性管,不能肯定就是大肠菌群细菌,经过证实试验后,有时可能成为阴性。有数据表明,食品中大肠菌群检验步骤的符合率,初发酵与证实试验相差较大。因此,在实际检测工作中,证实试验是必需的。产气量与倒管: 在乳糖发酵试验工作中,经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡(有时比小米粒还小), 有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明,大肠菌群的产气量, 多者可以使发酵倒管全部充满气体,少者可以产生比小米粒还小的气泡。如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时,可以用手轻轻打动试管,如有气泡沿管壁上浮,即应考虑可能有气体产生,而应作进一步试验。大肠杆菌测定—— EMB 选择性分离鉴别 EMB 平板典型大肠杆菌菌落特征: 中心黑色或紫红色,有或无绿色金属光泽大肠杆菌测定—— EMB 选择性分离鉴别 EMB 是一种弱选择性培养基,一些球菌也可在该培养基上生长; 高压灭菌可使得美蓝还原从而使培养基的颜色呈不均一橘黄色,轻轻摇动培养基可以恢复原有的正常紫色,倾注平板前应先摇匀; 大肠杆菌在该培养基上并不一定总是呈现绿色的金属光泽; 该培养基受可见光易使其中的成分氧化,储存及培养细菌时都应在避光条件。无色弗氏志贺氏菌无色粪链球菌无色鼠伤寒沙门氏菌粉色,中心色深阴沟肠杆菌粉色,中心色深肺炎克雷伯氏菌紫黑色,有绿色金属光泽大肠埃希氏菌菌落形态菌名
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