来评价食品的卫生质量,推断食品中有否染肠道致病菌的可能。样品中大肠菌群系以100mL(g)检样内大肠菌群最大可能数(MPN)表示。细菌学检验程序样品细菌总数大肠菌群水样稀释或不稀释水样稀释或不稀释第一步------初步发酵试验倾注平板培养(乳糖发酵)37℃24小时37℃24小时菌落计数第二步------平板分离培养(取平均数报告)(转种鉴别培养基)37℃24小时革兰染色镜检第三步-------乳糖复发酵试验报告结果三、实验器材1、恒温培养箱(36℃±1℃)、恒温水浴锅(46℃±1℃)、天平、灭菌培养皿、试管。2、培养基及试剂:乳糖胆盐发酵管、伊红美蓝琼脂平板(EMB)、牛肉膏蛋白胨培养基1.以1ml无菌吸管吸取样品1ml加入9ml无菌生理盐水,使样品(自来水、饮用水、饮料等)成1:10、1:100、1:1000等几个稀释度;样品(下水道水、牛奶)稀释度要适当高。2.分别在无菌平皿内加入1:100、1:10、原样的样品各1ml,每个稀释度均做一个平板。注意:先加浓度低的样品,再加浓度高的样品3.将冷却45℃的营养琼脂倾注于平皿中,摇匀,置37℃培养24小时。四、实验步骤-细菌总数测定平皿分4部分点数(见图)求同一稀释度的平均菌落数如:A1数+A2数+A334、菌落计数:1)平板菌落数的选择2)稀释度的选择3)菌落数的报告菌落数<100按实有数报告菌落数>100采用两位有效数,后面数值四舍五入(也可用10的指数表示)无法计数无法计数报告(注明水样的稀释倍数)5.菌落计数的报告:★稀释度的选择:1.应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之2.若有两个稀释度其生长之菌落数均在30-300,则应视二者之比如何来决定,若其比值小于2,应报告平均数。若其比值大于2则报告其中较小的数字。3.若所有平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
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