荡初发酵试验阳性结果的发酵管,用3mm接种环或灭菌棒(2-3环)将培养物转接到EC培养液中。在44.5℃±0.5℃下培养24h±2h(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面,提高培养温度可造成不利于来自自然环境的大肠菌群的生长)。接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。培养后立即观察,发酵管产气则证实为菌群阳性。Р 记录:复发酵阳性管数Р Ps:接种过程(亦有参考视频可供学习)Р ①接种前的准备工作。Р a.检查接种工具,进行环境消毒。Р b.在欲接种的培养基试管上贴好标签,标上接种的菌名、操作者、接种日期等。 cР .将培养基、接种工具和其他用品全部放在实验台上摆好,进行环境消毒。Р ②接种方法Р 接种方法: 斜面接种Р 将菌种试管与待接种的试管培养基依次排列,挟于左手的拇指与其他四指之间,用右手的无名指与小指和手掌边拔出棉塞并挟住。Р 置试管口于酒精火焰附近。Р 将接种工具垂直插入酒精火焰中烧红,再横过火焰3次,然后再放入有菌试管内,在管壁上停留片刻待其冷却。Р 取少许菌种置于另一支试管中,按一定的接种方式把菌种接种到新的培养基上。取出接种工具,试管口和棉塞进行火焰灭菌。Р 重新塞上棉塞。烧死接种工具上的残余菌,把试管和接种工具放回原处。Р 4、计算(参考HJ/T 347-2007)Р 其他问题:Р 1、样品的保存: 采样用的容器使用前应盖好瓶盖,用牛皮纸将瓶盖和瓶颈处包裹好,置干燥箱160℃-170℃干热灭菌2h,或用高压蒸汽灭菌器121℃灭菌15min。采样后水样的正确保存也很重要,如保存不当可使样品中的大肠菌群细菌死亡或在一定条件下再生长,这些都将影响检测结果的准确性。检测室接到水样后,应立即检测,如因故不能检测时,应立即将样品置于冰箱内Р(2℃-10℃)并于2小时内检测。Р 2、多管发酵法所用的发酵管、小玻璃倒管和塑料盖可在清洗、高压灭菌和紫外线消毒后重复使用
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