物静脉注射入血后,首先快速进入血流量大的组织,如心、肝、肾、肺、脑等,然后缓慢地向血流量小的组织,如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。Р【器材与药品】? 754型紫外分光光度计,液体涡旋混和器,数学坐标纸、半对数坐标纸各一张。氨茶碱标准液,0.1mol/L HCl,0.1mol/L NaOH,异丙醇:氯仿抽提液(5:95)。Р【实验动物】? 家兔Р【实验步骤】Р 1.取体重2.5-3kg健康家兔1只,一耳缘静脉注射氨茶碱15mg/kg,另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。? 2.分离血清,各管均取血清0.5ml于15ml试管中,加0.1mol/L盐酸0.2ml、抽提液5ml,振摇混合,2500r/min离心10min。Р3.吸取下层氯仿液4ml置另一试管中,加入0.1mol/L NaOH溶液4ml,振摇混匀,2500r/min离心10min。?4.吸取上层碱液,以0.1mol/L NaOH溶液作参比,测定其在λ274和λ298处的吸收度(A274和A298),计算△A。?5. 制作茶碱标准曲线:取5支试管,依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100µl,各加入0.1mol/L NaOH溶液4ml,终浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5µg/ml,测定各管的A274和A298,计算△A。以茶碱浓度为横坐标,△A为纵坐标描点绘图,用Excel软件求直线回归方程,即为茶碱标准曲线的直线方程(图示)。Р①将茶碱浓度和吸光度的数据录入Excel的工作表中。Р茶碱标准曲线的制作Р茶碱标准曲线的制作Р②选取Excel表上任一格,点击菜单“插入/图表”,?出现“图表指南”,选取“XY散点图”,进行下一步。Р茶碱标准曲线的制作Р③“数据区域”选取茶碱浓度和吸光度相关数据,“系列产生在-列”,直至完成。
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