化学物质与酶的相互作用

IKs SKi Ki?? ??max[ ][ ] [ ](1 ) [ ](1 )'V SvI IKm SKi Ki?? ??将该方程作双倒数处理,可得1 [ ] 1 1 [ ](1 ) (1 )max [ ] max 'km I Iv V Ki S V Ki? ???1,竞争性抑制作用竞争性抑制作用中I只与自由酶结合,因而阻止S与酶结合。而S又不能与EI结合,I也不能与ES结合,所以EIS不存在;EI亦不能分解成产物。—个竞争性抑制剂只增加酶—底结合的表现Km(Kmapp),即I浓度增加,Kmapp就增加;而Vmax则保持不变。在竞争性抑制剂存在下, 要达到最大反应速度Vmax,必须加入更高的底物浓度。如[S]>100Km时,Vmaxi可达Vmax。竞争性抑制剂对酶促反应的抑制程度,决定于[I],[S],Km和Ki的大小。[I]一定,增加[S], 减少抑制程度;[S]一定,增加[I],增加抑制程度,Ki值较低时,任何给定[I]和[S],抑制程度都较大;Km值越低,在一定[S]、[I]下,抑制程度越小。竞争性抑制作用的双倒数图1 1 [ ] 1(1 )max [ ] maxKm Iv V S Ki V? ???竞争性抑制作用Ki的求解①从双倒数图计算出表观米氏常数Kmapp,然后代入Kmapp=Km(1+[I]/Ki)可计算出Ki。②从双倒数图求得各I浓度下的Kmapp值对相应[I]再作图,从再制图的纵截距可直接测得Km,从其横截距可直接测得Ki。③从不同固定[I]下所作一簇直线的斜率1/S对相应[I]再制图,其纵截距为Km/Vmax, 斜率为Km/VmaxKi,横截距即为-Ki。