为报道基因Mü员ǖ阑虮泶锊锏募觳猓反过来可判别作为“诱饵”和“猎物”的两个蛋白质之间是否存在相互作用。在此等人采用编码话肴樘擒彰傅腖魑1ǖ阑颍⑶以诟.8叩榷镏校⑾至酰合成酶复合体琫.⒎⑾制长霭被,后续的研究发现全长的谷氨酰合成酶几乎不与但在和突变株中,谷氨酰合成酶的表达量大大降低,加入。如果在和之间存在相互作用,那么分别位于这两基因的上游调控区引入受蛋白调控的序列。已经知道在和之间存在相互作用。结果发现只有同时转化了和融合表达载四川大学硕士学位论文.:琫琫.体的酵母细胞才有话肴樘擒彰富钚裕ザ雷;渲腥魏我桓鲈靥宥疾荒目前发展起来的各种双杂交系统大多是以等人建立的系统为基础的。这些新系统主要对报道基因,“诱饵”表达载体以及“猎物”表达载体等做了一些改进。其中一个重要改进是引入额外的报道基因,如广泛采用的基因。经过改造带有报道基因的酵母细胞,只有当被启动表达才能在缺乏组氨酸的选择性培养基上生长。大多数双杂交系统往往同时使用两个甚至三个报道基因,其中之一是。这些改造后的基因在启动子区有相同的转录激活因子结合位点,因此可以被相同的转录激活因子缟述的蛋白せ睢Mü庵炙鼗蚨嘀匮≡窦忍岣吡思觳饬槊舳扔旨少了假阳性现象。与其它技术相比,酵母双杂交省去了耗时耗力的蛋白表达纯化以及抗体制备步骤,并且可以用于高通量的筛选。可以立即得到新鉴定的蛋白质的基因克隆。由于编码了重叠区域的多个克隆常常都会被筛选出来,这样我们还可以得到参与相互作用的最小结构域。灵敏度高,可以检测到其它方法如免疫共沉淀,噬菌体展示检测不到的相互作用。用作文库筛选可以低成本评估大量相互作用。快捷与廉价的优点迅速发展成为一种常用的研究蛋白质相互逆境是指对植物生存与生长发育不利使植物产生伤害的各种环境因素的总称,根据环境的种类分为寒害、干旱、涝害、盐害等。植物对逆境的抵检测出半乳糖苷酶活性。作用的方法,.双杂交系统原理四川大学硕:宦畚
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