(1)取患者骨髓液l ml,肝素抗凝。Р(2)取1 00ul骨髓液数管,分别加入胞膜抗体(CD45.Per.CP及另外两种单克隆抗体),常温,避光,孵育1 5.20分钟。,Р(3)加2ml红细胞裂解液,混匀,5.1 0分钟,常温,避光,离心。(4)悬浮细胞加PBS(含0.5%BSA,0.1%NaN3)洗涤,离心5分钟。(5)悬浮细胞补足O.5mlPBS,上机待检。Р2.2.4结果判定Р用三色流式细胞仪CellQuest软件获取1 O,000个细胞,对数取样, 通过CD45/SSC设门分析各群细胞的抗原表达情况。流式细胞术检测结果以荧光强度在<1 02为阴性(negative),1 02 1 03范围内为弱阳一I生(dim),荧光强度在l 03-l 04范围内为强阳性(bright)。检查结果以抗原表达>20%为阳性。Р3.统计学处理Р所得数据经SPSS 1 4.v统计软件处理,阳性细胞率所得数据以均数士标准差表示,采用单因素方差分析,x 2检验,以a=0.05为检验水准,相关性用直线相关分析进行统计。Р结?果Р1.染色体检测Р1.1细胞遗传学结果Р28例患者中有26例行短期培养法R显带技术染色体核型分析。按照Durie.Salmon分期诊断标准I期5例,II期6例,III期1 5例。其中1 8 例为正常核型,8例核型异常(见表1,图1)。异常检出率为30.8%。8 例中异常克隆与正常克隆呈嵌合形式存在者7例,有染色体数目异常者 7例,染色体的增加累及3、1 9、2 l号(各3例),5、20号(各2例), X、6、7、9、l 2、l 8号(各l例)。染色体丢失累及l、l 2、1 3、2l、 22号(各2例),2、4、7、8、1 O、11、1 6、l 7号(各1例)。检出结构异常中累及8q24的2例,为t(8;14)(q24;q32)和t(8;22)(q24;q11)。涉及Р8
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