无菌试验,并按培养基的用途做生长试验,或选择性生长试验,或耐药筛选试验等。无菌试验:排除培养基生产、运输和贮存过程的污染可能。生长试验:检验培养基标本中可能存在的目标菌能否生长——分离培养的关键!解释:培养基在使用前随机挑选,培养1天,观察是否污染。非选择培养基(血平板、巧克力平板)选择培养基(淋球菌培养基、麦康凯平板等)单管生化培养基、微量管生化培养基、苯唑西林耐药筛选平板等无菌生长为合格。培养基生长试验自制培养基:每批做质控用菌株根据期望结果选择确认要求生长特性(溶血、特征菌落等)选择性(生长/不生长,淋球菌选择培养基)加强营养(苛养菌、巧克力琼脂)鉴定用生化反应(阴性、阳性,如:氧化/发酵,动力等)质控菌株的贮存日常用:4-8℃,胰酶消化大豆肉汤(非苛养菌);高营养巧克力琼脂斜面(苛养菌),每周转种。中期贮存:50%胎牛血清肉汤,脱纤维羊血或脱脂牛奶,10-15%甘油胰酶消化大豆肉汤,-20℃。长期贮存:冻干或液氮。二、主要试剂(至少)每个工作日或每次试验应做质控(阳性对照及阴性对照)过氧化氢酶:区别链球菌属/葡萄球菌属,少见G-菌、G+菌凝固酶:区别金黄色葡萄球菌/凝固酶阴性葡萄球菌,药敏标准致病性和用药等都不同氧化酶:G-菌区别,肠杆菌科/非发酵菌/弧菌科/少见G-菌等β-内酰胺酶:预测流感嗜血杆菌、卡他布兰汉菌和淋病奈瑟菌对青霉素类抗生素敏感性;葡萄球菌属对青霉素敏感性。临床意义过氧化氢酶,凝固酶,氧化酶是临床常见菌鉴定非常重要的三个基本试验,也是决定鉴定方向的重要指标;β-内酰胺酶在判断苛养菌流感嗜血杆菌、卡他布兰汉菌和淋病奈瑟菌对青霉素、阿莫西林和氨苄西林的敏感性。应每个工作日做质控,或在检测菌株时用相应的标准菌株作为阴性对照和阳性对照做质控。具体要求过氧化氢酶(H2O2)区别链球菌属/葡萄球菌属,少见G-菌、G+菌阳性对照:25923阴性对照:12228
全文预览
