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miR-155调控HGAL的表达和增加淋巴瘤细胞的运动幻灯片

上传者:塑料瓶子 |  格式:ppt  |  页数:19 |  大小:1034KB

文档介绍
病有作用。Р方法Р寻找miRNA靶基因和结合位点?RNA分离和miRNA定量PCR( real-time PCR)?DNA构建?荧光素酶报告实验?趋化实验?RhoA pull-down assayРmiRNA155抑制HGAL的表达:mRNA水平的检测РB.Raji细胞系中转染高表达hsa-miR-155通过real-time PCR在转染24, 48, 和 72小时后检测HGAL mRNA水平。Р结果Р从图中可以看出,在转染hsa-miR-155 72小时后HGAL mRNA的降低水平大到最大РmiRNA155抑制HGAL的表达:mRNA水平的检测РC.MC116细胞系中转染高表达hsa-miR-155通过real-time PCR在转染24, 48, 和 72小时后检测HGAL mRNA水平Р结果Р从图中可以看出,在转染hsa-miR-155 48小时后HGAL mRNA的降低水平大到最大РMiR-155直接作用于HGALmRNA的3'-UTR上РD、HeLa细胞系中:野生型和3'-UTR突变HGAL融合双荧光素酶报告基因。黑柱代表共转染hsa-mir-155与报告基因与3'-UTR突变M1或M2,灰柱表表共转染hsa-mir-155随机突变载体与报告基因。从图中可以看出miR-155可能结合位点M1突变后荧光素活性没有恢复,M2突变后荧光素活性恢复85%。Р结果Р说明了miR-155转录后调控HGAL的表达是通过与HGAL-3'UTR上的M2结合位点。РMiRNA155增加淋巴瘤细胞的运动性Р结果Р说明了MiRNA155增加淋巴瘤细胞的运动性.РA.我们探索了miR-155对Raji, VAL和MC116 淋巴瘤细胞SDF-1和 IL-6趋化运动的影响。和对照组相比,转染了hsa-miR-155显著减少了HGAL蛋白表达,加强了SDF-1-诱导的的淋巴瘤细胞趋化运动。

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