③L-红霉糖转至内酯环的C-3位羟基上形成3-α-L-碳霉糖基红霉内酯B;④D-红霉氨基糖结构部分转移至C-5羟基后得到红霉素D;⑤红霉素D在C-12羟基化可得红霉素C,红霉素C再甲基化则得红霉素A;⑥红霉素D的红霉糖部分甲基化可形成红霉素B 。红霉素生物合成过程中红霉素反馈调节生物合成最后一步酶—甲基化酶的活性,而丙酸激酶和丙酰-CoA羧化酶的活化与红霉素合成有关。发酵红霉素发酵属于好氧发酵过程,在发酵过程中,需不断通入无菌空气并搅拌,以维持一定的罐压和溶氧。发酵过程中应严格控制发酵温度、发酵液还原糖量、pH值、溶氧量及发酵液粘度等,以便红色糖多孢菌能够大量合成红霉素并排至胞外。生产中还要加入消泡剂以控制泡沫。在发酵期间每隔一定时间也要取样进行分析、镜检及无菌试验,检测生产状况,分析或控制相关参数。发酵液的预处理和过滤发酵液中除含有约0.8%的红霉素外,绝大部分是菌丝体、蛋白质、色素、油等杂质,给提取和精制带来困难。尤以蛋白质和油等的存在,在溶媒萃取时将产生严重的乳化现象。一般采用硫酸锌沉淀蛋白质,促使菌丝结团加快滤速。加入去乳化剂(十二烷基苯磺酸钠,DS),由于硫酸锌呈酸性,为了防止红霉素局部酸解而破坏,要用NaOH调节pH值。由于锌离子的毒性给滤渣处理带来一定困难,改用碱式氯化铝有利于处理滤渣。经过预处理的发酵液便可进行过滤去除菌丝体及沉淀的蛋白质。红霉素发酵液过滤采用板框过滤机。红霉素的提取红霉素分子结构中有一个二甲基氨基官能团,是一个弱碱,pKa=8.6,在酸性条件下与某些酸会形成盐,如红霉素乳酸盐。纯红霉素碱在水中溶解度较小,并随温度升高而减小,在55℃时溶解度最小,当pH>10.0时红霉素基本以游离碱的形式存在,能溶于乙酸丁酯中,当pH<6.0时,红霉素以盐的形式存在,其在水中的溶解度随pH降低而迅速增大。提取采用在乙酸丁酯及在水溶液(乙酸缓冲液)中反复萃取。
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