器材准备好,把玻璃器皿进行包扎,包扎好的玻璃器皿放入鼓风干燥箱 160 ℃1~ 2h 灭菌(2)无菌生理盐水、 MRS 培养基的制备取2.25g 氯化钠于烧杯中加 250ml 水搅拌至完全溶解,取 225ml 生理盐水倒入锥形瓶中包扎好,再分别取 9ml 放入两支试管中包扎好, 一并放入高压灭菌锅中 121 度灭菌 15min 取商业培养基 16.1g 于烧杯中加 250ml 水在电炉上加热至沸腾至完全溶解,制好的培养基倒入锥形瓶中包扎好,放入高压灭菌锅 121 度灭菌 15min (3)、酸奶中乳酸菌的分离 1个盛有 225 ml的无菌生理盐水;2支试管,各盛 9ml 的无菌水;加塞包扎于在 121 ℃高压蒸汽灭菌 15Min 。将酸奶样品搅拌均匀,用无菌移液管吸取样品 25ml加入盛有 225 ml无菌生理盐水的三角瓶中,振摇均匀,即为 1:10的样品稀释液。用1mL 无菌吸管吸取 1:10 样品匀液 1 mL ,沿管壁缓慢注于装有 9 mL生理盐水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及稀释液) ,振摇试管使其混合均匀,制成 1:100 的样品匀液。另取 1 mL 无菌吸管,按上述操作顺序,做 10 倍递增样品匀液, 制成 1:1000 的样品均液。酸奶菌悬液的配制另留一管不稀释留作对照( CK ) 10 -3 10 -4 10 -5 10 -6 10 -2 10 -7 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 90ml无菌水 10 -1 花园酸奶 10ml1.0 ml1.0 ml1.0 ml1.0 ml1.0 ml1.0 ml 平板涂布用无菌移液管分别吸取 3个稀释度的菌悬液 0.1ml ,对号接种于与之对应的无菌 MRS 培养基平板中;尽快用无菌涂布棒将菌液在平板上涂布均匀,冷却后倒置于 36℃恒温箱中培养 48小时。
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