过滤器前蒸汽阀,全开空气阀 A01 、 A02 ,开冷凝水阀 V03 用空气吹过滤器,当罐压接近 0.05MPa 时关闭阀 V03 ,缓缓开空气管线切断阀 A03 ,空气进入发酵罐。当过滤器冷凝水阀 V02 排尽冷凝水后就可以关闭?关夹套蒸汽阀 S01 、冷凝水阀 V01 ,开夹套进水阀 W01 和循环管线切断阀 W02 。在控制器中将温度控制方式设定为“自动”,发酵罐进入自动降温阶段。按下搅拌开关,设定搅拌转速并“自动”控制。?在降温过程中,始终监视罐压,严禁压力掉零。当温度到达工艺要求时,调节搅拌转速、空气流量、罐压、标定溶氧电极斜率及校正 pH 电极的零点。三、接种?调节进气量至 300 - 1000L/h ,开排气阀至罐压接近于 0 (不得大于 0.2kg/cm3 ),放松接种口,在火焰保护下打开接种口,迅速将种子倒入,旋紧接种盖,立即调高罐压,在控制器的初始化菜单中设定发酵批号,并开始进行发酵。四、补料?将灭菌消毒的补料瓶放好,手动安装好输液管,使中间接头嵌在蠕动泵凹槽内?用酒精棉球擦拭罐盖补料口,打开盖后将针头迅速插入并穿透密封盖。?打开蠕动泵手动开关,使料液管中充满料液,置开关为自动。五、发酵及取样检测?取样器消毒:半开阀 P02 ,开蒸汽阀 S03 ,蒸汽进入取样器,消毒时间 5-10 分钟。?关蒸汽阀 S03 ,全开出料阀 P02 ,准备取样。?逆时针转动取样阀 P01 手柄,进行取样。回转手柄。?开蒸汽阀 S03 ,冲洗取样器,关阀 S03 。取样结束。?放料发酵完毕通过取样口放料。?离心以 5000r/min ,离心 5min ,取下层沉淀。将沉淀反复水洗,至上清颜色变淡?超声波破碎将沉淀用水溶解后用超声波 3s 间隔 2s 进行 30 次,再离心取上清液,即所有提取的菌体蛋白。-40 ℃冷冻保存。?使用冷冻干燥机冷冻干燥制得蛋白质干粉。六、发酵后处理
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