物的灵敏度是一样的, 解决了质谱不同其离子化程度和基质干扰不同而带来的问题; 其次, NMR 无损伤性,不破坏样品的结构和性质,可以扩大实验可操作的范围,在接近植物原有的生理条件下就可以进行实验,而且可在一定的温度和缓冲液范围内选择实验条件, 更方便进行实验的实时和动态检测。此外,颜贤忠[ 7 ] 等人研究发现: NMR 氢谱的谱峰一一对应着化合物的氢原子,并且所测样品中每个氢原子都有其相关的谱峰存在, 且样品中各组分的相对含量能从图谱中信号的相对强弱反映出来, 检测效果更为直观方便。此实验再次证明了 NMR 方法能够广泛应用于植物代谢组学,来检测代谢产物中的复杂成分。 Hyung-Kyoon [ 8 ] 等(2004) 用 1H-NMR 对野生型和转基因烟草(Nicotianatabacum) 的叶片和叶脉进行了研究,转基因烟草为过表达水杨酸合成基因, 通过进行烟草花叶病病毒( TMV )嫁接和对照实验, 得到多个峰值变化, 大部分峰被鉴定为氯原酸、苹果酸和糖。此实验提供了一种有效的区分野生型和转基因植物的方法,且不需多步预处理程序。但是 NMR 的缺点也是很明显的,应用 NMR 时对样品制备的要求很高,因其灵敏度低,有可能造成信号重叠,因其动态范围有限, 很难同时测定生物体系中共存的浓度相差较大的代谢产物。( 2 )高效液相色谱高效液相色谱法( HPLC )是 20 世纪 60 年代后期发展起来的一种分析方法。近年来,在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有 80% 的有机化合物可以用 HPLC 来分析测定。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统, 将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相通过泵进入装有固定相的色谱柱,在柱内分离出各种组分,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
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