常肺支气管上皮细胞BEAS-2BР30例初治肺腺癌患者Р30例小细胞肺癌患者Р30例健康人Р?Р细胞培养Р干血斑法收集血样Р?Р代谢产物提取、代谢组学仪器及数据分析Р对比分析三组检测结果,确立小细胞肺癌潜在的代谢肿瘤标志物Р?Р进行生物信息学分析,筛选出一种或几种导致小细胞肺癌形成的目标基因Р?Р细胞水平筛选驱动基因Р人正常支气管上皮细胞BEAS-2BР小细胞肺癌细胞NCI-H446Р细胞免疫化学方法定性初筛Рwestern-blot检测РqPCRР筛选出一种小细胞肺癌表达上调的驱动基因Р驱动基因进一步验证Р小细胞肺癌细胞NCI-H446Р目标基因敲减的小细胞肺癌细胞NCI-H446Р?Р检测细胞信号通路变化Р肿瘤细胞生物学行为变化Р细胞划痕实验РTranswell实验Рwestern-blot方法Р四、可行性分析Р1、代谢组学科研合作单位:加州大学圣地戈分校医学院,Hillcrest的附属医院线粒体疾病中心。该中心是美国较早开展新一代靶向代谢组学研究的科研单位之一,拥有多台世界先进的超高效液相串联质谱仪和世界一流的代谢组学服务平台,具有先进的生物信息学分析技术。Р2、本研究所涉及的其它实验技术和方法为目前成熟的分子生物学研究手段。Р3、团队成员常年从事肺癌临床诊治及基础理论相关研究,承担过多项科学基金,有丰富的科研经验,能够为本课题的顺利实施提供保障。Р五、本项目的特色与创新之处Р在近7年已发表的63篇肺癌代谢组学方面的论文中,只查找到一篇研究小细胞肺癌的文章。没有查找到同时研究人体样本和细胞样本的文章。Р本课题通过代谢组学方法寻找小细胞肺癌肿瘤标志物,进而通过生物信息学分析,对小细胞肺癌发生的分子机制进行深入研究,思路新颖。Р六、年度研究计划Р2017年4月-2017年6月:收集样本、查阅文献。Р2017年7月-2017年10月:代谢组学分析,找到肿瘤标志物,撰写论文。