每孔100ul37℃,15分钟。⑤加终止液(2mo1/LH2SO4),每孔50ul。于酶标仪上读取吸光度(A)值。结果判定:①阴性对照平均A值必须小于0.2;弱阳性对照平均A值在0.20~0.65;弱阳性对照与阴性对照平均A值之比必须大于或等于2。符合以上3个条件,本次试验结果可信,否则必须重复检测。②若待测血清孔呈色较弱阳性对照孔深则判为阳性,反之为阴性。但在弱阳性对照A值±10%范围内应复测一次,如确实高于弱阳性对照则判为阳性。6、参考区间正常人血清抗巨细胞病毒抗体IgM为阴性。7、质量控制(1)不同试剂盒所用抗原可能存在差异,检测敏感性也有差别,应参照阳性、阴性对照设定cutoff(co)值。(2)试剂盒自冰箱取出后应恢复至室温(18~25℃)后再开封使用。(3)不同厂家、不同批号试剂不可混用,不得使用过期试剂。(4)溶血、脂血、细菌污染血清不宜使用。(5)洗涤微孔板时应彻底,孔内残留液体应在吸水纸上拍干,否则会影响测试结果。(6)检验人员应经过操作前培训,熟悉判读结果;所使用加样器,酶标仪设备应定期进行校正,以确保实验数据的稳定。8、临床意义(1)巨细胞病毒(CMV)是人类病毒性感染的常见病原体之一。CMV感染可引起多种传染性疾病,特别是围产期孕妇感染是引起胎儿宫内发育迟缓、发育畸形的主要原因,可影响神经系统发育及导致智力障碍。(2)血清中抗HcMY-IgM抗体阳性有助于对急性或活动性HcMV感染的诊断,脐带血查出抗HcMV—lgM抗体说明胎儿宫内感染。(3)抗HcMV—IgG抗体阳性对诊断既往感染和流行病学调查有意义,若间隔3周后抽取血清该抗体阳性滴度升高4倍以上(双份血清进行对比),则对判断HCMV近期复发感染有意义。(4)由于技术上的原因和生物学上的交叉反应,对阳性结果的意义应结合临床综合分析,尤其是孕妇,不应仅将抗HcMV—IgM抗体阳性作为终止妊娠的依据。
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