BD FACSCalibur流式细胞术标准操作规程

quire-Disconnect to cytometer;Р12.3.7File下退出CellQuest/CellQuest Pro软件。Р12.4 Analysis数据分析(用ModFIT软件)Р12.4.1在苹果菜单下打开ModFIT软件,OK-OK-进入软件主屏;Р12.4.2在File下打开数据保存文件夹,文件夹类型设为ALL File,选出待分析的文件;Р12.4.3选择参数Choose parameter of analysis,选P6(FL2-A),双击;Р12.4.4在设门中选择Defile gateР -Gate1:X轴选P7(FL2-W),Y轴选P6(FL2-A),OK,然后在图中圈出你所要分析的细胞;Р -Gate2:X轴选P1(FSC),Y轴选P2(SSC),OK,然后在图中圈出你所要分析的细胞;Р -OK后出现一个峰图。Р12.4.5对这个图进行分析Р12.4.5.1自动分析(点击工具栏中的Auto键)。Р12.4.5.2手动分析:Р1)单击工具栏中的Mod键:选择分析所要的参数(是否有凋亡Apoptosis,是否有标准参照Standard,是否有聚集体),选择有几个Cycle(二倍体、四倍体、异倍体),并对每一个循环是否有S期和G2/M期进行定义-OK;Р2)确认每个峰的位置,并将Range放置于不同的峰上;Р3)单击工具栏中的Fit键,软件开始以最小乘法拟合曲线,并进行统计;Р4)此外,还可以点击工具栏中的Diags键来得到关于分析结果的一系列评估指标。Р12.4.6 Save As保存分析结果,Print打印分析结果Р12.5结果报告:Р报告中至少应包含以下信息:①DNA倍体,包括所有群体的DI②主要G1峰的CV③S期比例④必要的简单评价:如细胞数的不足、碎片较多、CV太高等Р相关记录Р 《流式细胞仪BD FACSCalibur使用登记表》