2.5Р白色念珠菌Р1Р45Р48Р0Р83.3Р2Р35Р39Р0Р89.7Р3Р50Р55Р0Р90.9Р黑曲霉Р1Р34Р38Р0Р89.5Р2Р27Р31Р0Р87.1Р3Р28Р29Р0Р96.6Р试验组菌回收率(%)=Р由表2可见参榆灌肠液用培养基稀释法,三次平行试验大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都达到了70%,说明培养基稀释法用于参榆灌肠液计数结果是准确的。Р备注:如培养基稀释法回收率仍低于70%,采用薄膜过滤法再次进行试验。验证资料中需体现常规法、培养基稀释法及薄膜过滤法三种验证方法及结果。具体操作如下:Р3.6.4.3.3 薄膜过滤法:Р供试液制备:取1:10供试液10ml放入离心管中,将离心管放入离心机,500转/min离心3分钟,取上清液。(注:仅细菌计数可用低速离心,霉菌及酵母菌计数不可采用。)Р①试验组:取1:10上述供试液1ml加pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液100ml稀释过滤,用400ml(备注:具体用量依样品抑菌作用强弱而定,在试验中需设计不同的冲洗量进行冲洗,根据回收率的情况选择不同的冲洗量)pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每次100ml,在最后一次冲洗液中分别加入试验用菌液1ml,过滤后无菌方法取出滤膜,菌面朝上贴于营养琼脂或玫瑰红钠琼脂平板上,细菌350C培养48小时,霉菌及酵母菌250C培养72小时。Р②菌液组:分别取上述稀释的菌液1ml注入平皿内,每个菌平行制备2个平皿,测定所加的试验菌数。Р③供试品对照组:取1:10供试液1ml采用上述薄膜过滤法冲洗过滤,分别置350C培养48小时和250C培养72小时。以测定供试品的本底菌数。Р 上述方法平行实验3次Р④结果见表3 Р表3.参榆灌肠液细菌.霉菌和酵母菌回收率的测定(薄膜过滤法)Р菌种类型Р试验Р试验组Р菌液组Р供试品Р回收率
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