浓度约为80%的浓缩红细胞。吸取浓缩红细胞40ul加入到2ml生理盐水中充分混匀,即得到1.5%红细胞悬液。Р5.2 准备1.5%红细胞悬液和1.5%供者红细胞悬液以及供受者血浆。Р5.3 现在微柱中加入50ul BLISS液,然后在主侧反应柱中加入供者红细胞悬液20ul及40ul受血者血浆,次侧反应柱中加入患者红细胞悬液及40ul供血者血浆。Р5.4 37℃孵育10-30分钟;Р5.5 离心并判读结果(注意离心必须在加完样30分钟内进行)Р6、结果判读Р阴性结果(-):无溶血及红细胞未凝集,红细胞全部沉着与柱的底部;Р阳性结果(+):红细胞凝集,凝集后的红细胞悬浮于柱顶端。如发现溶血现象,则应先将血浆助于56℃水浴30分钟以灭活补体,然后再重复柱凝集试验,观察红细胞凝集现象。Р7、结论:Р阳性表示受(供)血者血清中含供(受)者红细胞血型Ag相应的Ab(IgG、IgM),供受血者不相容,阴性表示供受血者相容。Р8、注意事项:Р8.1 试剂卡保存温度为2-25℃,如果温控标志变红,表明卡内试剂可能失效,不宜使用;如果试剂卡保存2-8℃冰箱,使用前应先平衡温度至室温。Р8.2 不使用过期试剂卡;Р8.3 试剂卡被冷冻过,或卡内液体发生蒸发,可能导致假阳性结果;Р8.4 避免使用外观有破损的试剂卡,例如气泡、断层、封口纸破损或颜色发生改变等;Р8.5 要严格按照操作指导配置和使用红细胞悬液,不要使用被微生物污染的材料,不要使用含有颗粒物质或溶血样本,否则可能导致错误结果;Р8.6 正反定型的结果要吻合,否则需要进行进一步的分析检验以明确结果不吻合的原因;Р8.7 由于抗原性减弱,衰老红细胞的反应会弱于新鲜红细胞;Р8.8 对于部分病例(如新生儿、老年患者或免疫功能低下的患者),其ABO抗体可能很弱或缺失;Р8.9 样本中的异常血清蛋白可能会导致红细胞聚集,而被错误地盘判读为凝集。
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