核酸检测技术??直接对动植物有害生物基因序列和结构进行测定。??核酸的分离纯化?PCR技术?核酸杂交技术РР第1节?核酸的分离纯化РР核酸的分离纯化的原则Р保持核酸一级结构的完整性?提高核酸制品的纯度РР技术路线的设计РР破碎细胞的方法РР机械 （匀浆、超声破、研磨等）Р非机械（化学处理、生化法）РР沉淀是浓缩核酸最常用且高效的方法。РР优点Р缺点Р乙醇Р对盐类沉淀少，易挥发除去，不影响后续实验Р需要量大，低温操作Р异丙醇Р需体积小，速度快，一般不需低温长时间放置Р易使盐类、糖类与DNA共沉淀；异丙醇难以挥发除去РР核酸浓度检测与完整性测定方法Р浓度测定? 紫外分光光度法 260nm? 荧光光度法 ?? EB荧光Р完整性测定?琼脂糖凝胶电泳法：以EB为示踪剂的核酸凝胶电泳结果为依据。?基因组DNA片段如发生降解，电泳图呈拖尾状；?完整的或降解很少的总RNA电泳图谱中，三条带的荧光强度积分应呈特定的比值РР问题一：DNA样品不纯? 抑制后续酶解和PCR反应РDNA提取常见问题РРDNA提取常见问题Р问题二： DNA降解РРDNA提取常见问题Р问题三： DNA提取量少
全文预览
