核酸检测

。?经过治疗后的HBsAg转阴，ELISA方法检测阴性的献血者。Р编辑课件РРNAT与ELISA互补Р病毒变异?免疫静默期?实验操作失误?病毒感染的窗口期Р编辑课件РР病毒检测窗口期Р项目РELISA窗口期Р项目РNAT窗口期РHBsAgР56РHBVР25Р抗-HCVР72РHCVР59Р抗-HIVР22РHIVР11Р编辑课件РР血筛用NAT试剂与临床用的不同РР编辑课件РР目的和要求不同Р定性与定量?临床使用核酸检测主要目的是定量监测，进行疗效分析。?血筛用于病原体的定性筛查?灵敏度和特异性?临床在漏检与误差之间更重视误差?血液筛查用核酸目的是保证用血安全，更重视漏检?质控要求不同?临床用与血液筛查用质控要求也不同。临床试剂以定量准确和防止误报为质控目标?血筛用以防止漏检为主要目的?阳性率也不同?临床更多的阳性；血筛更多是阴性?对自动化要求不同?临床更多用于病人,单人份检测,标本量少?血筛更多用于正常人，因此检测量不同，对自动化的要求也不同Р编辑课件РР血筛用NAT平台的要求Р灵敏度?HBV≤10IU/ml；HCV、HIV≤200IU/ml?特异性?核酸的特异性高，几乎没有方法学假阳性?但要防止污染?内标（内对照）?为避免假阴性，要求每管阳性质控?自动化?大规模、高通量Р编辑课件РР关于灵敏度的几个问题Р厂家宣传的灵敏度均指单人份检测，而非推荐pooling方案的实测灵敏度?实际应用灵敏度=宣传灵敏度×pooling数?IU才有可比性：WHO标准品以及国家一级标准品均以IU为单位?HCV、HIV窗口期浓度高，因此对灵敏度要求较低。?美国FDA要求，HCV、HIV5000IU/ml能在pooling方案中被检出?HBV的窗口期标本在30-300IU/ml之间，因此对灵敏度要求高?低于灵敏度也有检出的可能，这与取样几率有关Р编辑课件РР血液筛查常用的NAT技术РР编辑课件