循环肿瘤细胞技术进展

骨髓和其他器官CTC能在哪些方面给我们思考和启示?如何获取CTC?获取CTC需要解决的技术问题从红细胞和白细胞中富集恶性肿瘤细胞?将恶性肿瘤细胞与红细胞、白细胞、正常上皮细胞、造血干细胞等区分开来每10mL血液中可能仅含有几个到几十个循环肿瘤细胞,而10mL血液中含有的白细胞约有1亿个,红细胞有500亿个。三种技术过滤法ISET:?IsolationbySizeofEpithelialTumorcells8μm孔径过滤膜,漏检体积较小的肿瘤细胞敏感性低梯度密度法肿瘤细胞和单核细胞密度小于1.077g/mlCTC纯度低,混入较多白细胞肿瘤细胞会迁移至血浆层,而聚集后容易下沉聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)对细胞有毒性免疫磁珠法肿瘤细胞表面抗原EpCAM与包绕着磁珠的特异性单抗相结合CellSearch细胞保存方法长达96小时实验室室间差异小EpCAM的假阳性和假阴性CellSearch---免疫磁珠+流式细胞分析+化学发光CellSearch是全球第一也是唯一经FDA批准可用于临床的循环肿瘤细胞(CTC)产品1983磁流体CellSearch免疫磁珠原理白细胞Anti-CD45CD45NucleusDAPI如何鉴别出CTC?藻红蛋白(PE)变藻蓝蛋白(APC)CTCAnti-EpCAM磁珠Anti-CK-PENucleusDAPICKEpCAM在CellSearch®检测中,CTC被设定为:EpCamCK-8,18和/或19DAPICD45+++-CellSave储存管CellSearchCTC检测试剂盒CellSearch:自动化的CTC分离、富集和计数CellTracksAutoPrep系统磁巢MagnestCellTracksAnalyzerII96小时稳定2004年FDA批准CTC质控试剂盒磁力?捕获FIRSTANDONLYAPPROVED