(原)溶解亢进遗传(t-PA/u-PA↑抗纤溶酶)? 获得(DIC,血栓症)Р血小板计数РBPC直径1-4m,与RBC,WBC或碎片、免疫复合物大小相等,?影响计数准确性。Р FCM优点: ? 利用各种BPC特异性单克隆抗体→直接标记荧光素分子? 快速、准确,排除非BPC颗粒干扰,误差<5% ,? 尤其适合BPC<20X109/L? 重复性好? ?缺点:技术条件要求高,费用高。Р6РFCM分析血小板原理Р利用荧光素标记的BPC特异性单抗或与待测成分特异性结合?且能发荧光的物质? + 分离BPC或全血?→去除未反应的单抗或荧光物质; ?→特异检测5000-10000 BPC光散射与荧光信号(单色或多色);?→获取, 统计数据, 分析,?→根据光散射与荧光强弱?→计算阳性BPC百分比或所测成分的含量(GP/BPC).Р7РFCM分析血小板方法Р抗凝血2ul调节BPC 105-106/ml? 2-80C 预冷的1% 多聚甲醛1ml固定,2h? BPC特异单抗+荧光剂(异硫氰酸荧光素)(CD42b FITC)?+SSC+FSC设门-特异性选择BPC.?检测10000-100000 BPC表面荧光信号.?FCM获取,分析数据Р 结果表示: 平均颗粒荧光强度-活化时GP:Ag量? 特异性荧光抗体结合阳性BPC% -x.Р8Р血小板光散射图Р9РFCM分析血小板的客观评价Р利用各种BPC特异性单克隆抗体→直接标记荧光素分子Р优点:?1、接近生理条件直接测定血小板:?2、微量(2ul)?3、快速、准确,排除非BPC颗粒干扰,误差<5%,主观因素少? 灵敏度高、尤其适合BPC<20X109/L、重复性好?4、克服BPC小;环境影响(血管壁、剪切力、刺激剂→变形、黏附、? 聚集、释放、血小板活化与反应性Р不足:?1、技术要求高,费用高。?2、不能反映与血管壁相互作用? ?,Р10
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