物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子Р2、生物大分子Р主要指蛋白质、酶和核酸Р3、提取DNA的基本思路Р利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分Р4、DNA的溶解性РDNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反Р5、讨论:Р①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下, DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?Р在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14 mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。Р当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出Р②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?Р8、DNA的鉴定Р① DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂Р②紫外灯照射法РA、配制染色剂,用蒸馏水配制万分之五的溴化已锭(EB)РB、将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴一滴EB溶液染色РC、将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260 nm处)Р③甲基绿(蓝绿色)Р二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计Р(一)实验材料的选取Р1、材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。(从中选取2~3种实验材料)Р2、原则:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大
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