操作程序;学习薄层层析在皂苷检识中的应用。学习薄层层析在皂苷检识中的应用。二、实验原理?果汁中含脂溶性杂质,用乙醚脱脂后,利于水溶性皂苷在树脂上的吸附,籍此提取皂苷,且利用Re溶于热乙醇,在冷乙醇溶解度小的特点析出Re,与其它成分分离。1.人参果汁总皂苷的提取人参果肉50g150ml水温浸(70℃,1hr),抽滤滤液1果肉合并,通过大孔吸附树脂D4020柱①;水洗至无糖反应②;90%乙醇(800~1000ml)洗脱③。回收乙醇乙醇提取物(人参粗总苷A)100ml水温浸(70℃,30′),抽滤滤液2果肉乙醇洗脱液三、实验方法2.人参皂苷Re的制备取4/5量的乙醇提取物少量展开剂2°溶解;上样于硅胶H(40g)柱展开剂1洗脱,每30ml为一流份收集Re粗晶BTLC检测,合并Re单一斑点的流份回收洗脱液至小体积(约20—30ml)放置、析晶95%乙醇重结晶Fr1Fr2Fr3……Fr13Re纯品C?注:①树脂柱用前需经无水乙醇处理;②可用α—萘酚糖反应检测,实际中可目测,至水洗液颜色变浅至清即可;③洗脱时,自紫色带即将流出时,开始收集洗脱液。收集1200~1500ml④需半周时间;⑤可用回流装置中脱色半小时。Liebermann-Burchard反应:取果汁1ml,加等量乙酸酐,滴加1滴浓硫酸,变成紫红色。取果汁1~2ml于试管内,激烈振摇,如产生多量蜂窝状泡沫,放置10分钟以上,泡沫不明显减少,示有皂苷成分。1)展开剂:1°氯仿:甲醇:乙酸乙酯:水(2:2:4:1,下层)2°氯仿:甲醇:水(65:35:10,下层)2)显色剂:5%硫酸乙醇溶液(110℃以上加热5分钟)显红色、紫红色斑点。四、鉴定四、鉴定1.泡沫实验2.显色反应3.薄层层析五、思考题11. 层析结果如何?若想进一步得到Re纯品应怎样程序处理?22. 根据皂苷性质、自行设计一种自人参根中提取总苷及皂苷单体分离的方案。
全文预览
