无菌检查法方法验证及操作要点

养。?2.4 培养基的适用性检查? 无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。Р 2.4.1无菌性检查? 每批培养基随机取不少于5支(瓶),培养14天,应无菌生长。Р2.4.2 灵敏度检查Р菌种Р金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉Р菌株传代次数Р不得超过5代Р培养基接种Р每种菌接种至2管相应的培养基,另取一支不接种作空白对照,按规定温度时间培养。Р结果判断Р空白对照管应无菌生长,每种菌接种后的2管培养基管均生长良好,该培养基的灵敏度检查符合规定。Р金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌接种至硫乙醇酸盐流体培养基中30~35℃培养3天;Р白色念珠菌、黑曲霉接种至改良马丁培养基中23~28℃培养5天。Р3. 稀释液、冲洗液及其制备方法Р 0.1%蛋白胨水溶液Р pH7.0氯化钠—蛋白胨缓冲液Р4. 方法验证试验Р 目的: 1)证明所采用的方法适合于该药品的无菌检查? 2) 确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不计。? 3) 确保在实际检验条件下,该供试品的无菌检查法的准确性、有效性和重现性。Р 验证时,按“供试品的无菌检查”的规定及下列要求进行操作。对每一试验菌应逐一进行验证。Р4.1 菌种? 1)金黄色葡萄球菌(usaureus)[(B)26 003]? 2)铜绿假单胞菌? (Pseudomonasaerugznosa)[(B)10 104]? 3)枯草芽孢杆菌? (Bacillussubtilis)[(B)63 501]? 4)生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)[(B)64 941]? 5)白色念珠菌? (Candidaalbicans)[(F)98 001]? 6)黑曲霉? (Aspergillusniger)[(F)98 003]