革兰氏染色及镜检操作规范培训质量管理部目录?一、革兰氏染色法?二、革兰氏染色原理?三、仪器设备、试剂?四、操作方法?五、镜检及结果判定?六、革兰氏染色图片?七、革兰氏染色注意事项?八、革兰氏染色小结一、革兰氏染色法?革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法, 1884 年由丹麦医师 Gram 创立。?细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,革兰氏阳性菌( G+ )不被脱去,革兰氏阴性菌( G- )可被脱去。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。?有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏阳性反应; ?弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现阴性反应。 G+ 和 G- 生物学特性的差异比较项目 G +细菌 G -细菌革兰氏染色反应能阻留结晶紫而染成紫色可经脱色而复染成红色肽聚糖厚,层次多薄,一般单层磷壁酸多数含有无外膜无有脂多糖( LPS )无有类脂和脂蛋白含量低(仅抗酸性细菌含有类脂) 高鞭毛结构基体上着生 2个环基体上着生 4个环产毒素以外毒素为主以内毒素为主对机械力的抗性强弱阴性菌阳性菌二、革兰氏染色原理? G+ 菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多且交联程度大,故经酒精脱色,失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故酒精处理,能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。? G- 菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄且交联程度低(松疏),经酒精脱色后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出,因此细胞退成无色,再经沙黄等红色染料复染,就使 G- 菌呈红色。三、仪器设备、试剂?生物显微镜?载玻片?草酸铵结晶紫染色液?革兰氏碘液?沙黄复染液或番红染色液?95% 乙醇
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