革兰氏染色及镜检操作规范培训演示文稿

革兰氏染色及镜检?操作规范培训Р质量管理部Р目录Р一、革兰氏染色法?二、革兰氏染色原理?三、仪器设备、试剂?四、操作方法?五、镜检及结果判定?六、革兰氏染色图片?七、革兰氏染色注意事项?八、革兰氏染色小结Р一、革兰氏染色法Р革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。Р细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,革兰氏阳性菌(G+)不被脱去,革兰氏阴性菌(G-)可被脱去。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。Р有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏阳性反应;?弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现阴性反应。РG+和G-生物学特性的差异Р比较项目РG+细菌РG-细菌Р革兰氏染色反应Р能阻留结晶紫而染成紫色Р可经脱色而复染成红色Р肽聚糖Р厚,层次多Р薄,一般单层Р磷壁酸Р多数含有Р无Р外膜Р无Р有Р脂多糖(LPS)Р无Р有Р类脂和脂蛋白含量Р低(仅抗酸性细菌含有类脂)Р高Р鞭毛结构Р基体上着生2个环Р基体上着生4个环Р产毒素Р以外毒素为主Р以内毒素为主Р对机械力的抗性Р强Р弱РG-菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄且交联程度低(松疏),经酒精脱色后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出,因此细胞退成无色,再经沙黄等红色染料复染,就使G-菌呈红色。Р三、仪器设备、试剂Р生物显微镜?载玻片?草酸铵结晶紫染色液?革兰氏碘液?沙黄复染液或番红染色液?95%乙醇