实验三实验三凝聚胺法凝聚胺法交叉配血交叉配血医学检验系张晨光目的:掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。原理:聚凝胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐,溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷, 有利于红细胞凝聚,低离子强度溶液也能降低红细胞的 Zeta 电位,可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在 IgM 或 IgG 类血型抗体时,与红细胞发生紧密结合,此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电荷,使 IgM 或 IgG 类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开; 如果血清中不存在 IgM 或 IgG 类血型抗体,加入解聚液可使非特异性凝集消失。试验分步原理未被血型抗体致敏的红细胞很快散开阴性结果?试剂: 凝聚胺试剂盒;生理盐水?器材:小试管、滴管、试管架、记号笔、显微镜、离心机。?标本:静脉血。操作? 1. 取试管两支,标明主侧次侧,主侧管加受血者血清(血浆)1滴,和供血者 3~5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴,次侧管受血者 3~5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)l滴, 加供血者血清(血浆)1滴。? 2. 各加 LIM 溶液 3滴,混合均匀后,再各加 Polybrene 溶液 1滴,并混合均匀,置室温 1分钟或参照说明书。?3.普通离心机 1000g 离心 15秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约 0.1ml 液体。
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