交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法) 临床血液教研室交叉配血交叉配血聚凝胺法: ?原理: 将红细胞和血清放置在低离子介质中孵育,可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合,再加入聚凝胺促进红细胞非特异性凝集。离心后加入重悬液(电荷中和 ),正常红细胞的凝集解散, 而抗体抗原结合引起的红细胞凝集仍然存在。操作步骤: ?抽取受血者静脉血 3~4ml ,枸橼酸钠抗凝,以生理盐水洗涤受血者红细胞 3次,配成 3% 红细胞悬液,同样方法处理献血者样本; ?取洁净小试管 2支, 1支标记为主侧管,另 1支标为次侧管; ?主侧管内加受血者血清 2滴、献血者红细胞悬液 1滴; 次侧管加献血者血清 2滴、受血者红细胞悬液 1滴; ?每管各加 LIM 溶液 0.6ml ,混匀,室温孵育 1min; ?每管各加 2滴聚凝胺溶液,混合后静置 15s; ?1300g 离心 15s ,倾去上清液; ?轻轻摇动试管,目测细胞有无凝集,如无凝集,必须重做; ?加入 2滴重新悬浮液,并轻轻转动试管混合,肉眼观察结果,必要时用显微镜观察结果。结果判断: ?主侧管和次侧管内红细胞凝集在 1min 散开,则为聚凝胺引起的非特异性凝集,表示受血者和献血者配血相容。?如果主侧管和/或次侧管内红细胞凝集不散开, 则表明两血不相容,献血者血液不可输注。注意事项: ?实验结果必须在 3分钟内判读?在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用 37℃-40 ℃生理盐水洗涤红细胞并置 37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。 LIM: 降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云, 可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合。聚凝胺:高价阳离子,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,促进红细胞非特异性凝集。重悬液:电荷中和。
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