流式细胞仪细胞分选的操作步骤

。Р ●Р ●取下样本管,换上1mL蒸馏水。点击获取控制窗口Standby。取下收集锥型管。离心浓缩(300g 5min),用培养液重悬,按实验所需条件进行培养。 3L 70% 乙醇(用无菌蒸馏水配制) 5L 无菌蒸馏水Р 2、在干净的鞘液筒中加入3L 70% 乙醇。盖紧盖子,振摇鞘液筒,确保桶内壁被乙醇充Р 分洗涤。安好鞘液筒。Р 3、将过滤器短接,否则乙醇将破坏滤膜。Р 4、用70%乙醇冲洗收集管接口处,并喷洒进样口处的空气。Р 5、在收集管接口处安装2支BD 50ml收集管(若不使用浓缩器)。Р 6、放上一支装有70 % 乙醇的进样管。Р 7、设分选门(画一个空门使机器进行分选操作)。Р 8、从Acquire menu选择SortSetup 。在Sort Gate菜单中选择步骤7设定的分选门。Р 按液流控制键RUN。Р 9、在Setup方框中打叉,点击Acquisition Control菜单中Acquire。。Р 10、跑乙醇直至2支收集管注满(每管注满需要9min),点击Pause,Abort。Р 11、再重复上述步骤2次,共需要1h。Р 12、断开鞘液筒,在鞘液筒中加入500mL 无菌蒸馏水,振摇鞘液筒,倒掉液体,反复Р 操作直至洗净桶内壁残余乙醇。Р 13、在鞘液筒中加入3L无菌蒸馏水,盖紧盖子。安好鞘液筒。Р 14、在收集管接口处安装2支新的收集管。Р 15、放上一支装有无菌蒸馏水的进样管。Р 16、点击Acquisition Control菜单中Acquire。Р 17、跑无菌蒸馏水直至2支收集管注满(每管注满需要9min),点击Pause,Abort。Р 18、再重复上述步骤2次,共需要1h。Р 19、在鞘液筒中加入3L PBS(即鞘液),盖紧盖子。安好鞘液筒。Р 20、放上一支装有PBS的进样管。Р 21、恢复过滤器的连接。Р 22、执行每日关机程序。