2.1. 方法1: 用胸苷合成酶抑制剂(Frdu)诱导的方法Р2.1.1. 外周血接种于加有5%小牛血清的Tc199培养基中,37℃培养72小时。Р2.1.2. 加入0.05mmol/L Frdu继续培养17小时。Р2.1.3. 加入2.2mmol/L咖啡因,6小时后常规收获制片,显带处理。Р2.2. 方法2同时显示脆性X和迟复制X染色体的方法Р2.2.1. 取女性外周血0.5ml接种于5%小牛血清的Tc199培养基中,37℃培养72小时。Р2.2.2. 加入0.1mmol/L Frdu继续培养17小时。Р2.2.3. 于收获前5.5小时同时加入最终浓度为12mg/ml Brdu和2.2mmol/L咖啡因,Р2.2.4. 常规收获制片,R带处理,在光镜下观察,可见LX和fra(x)(q27).Р3. 显带观察:РG显带标本上3p14有脆性位点出现,说明培养体系成功,对于fra(X)应在G显带标本上确定fra(X)染色体即诊断为阳性,典型fra(X)家系,母亲为携带者,儿子智力低下家族或有脆性X综合征临床表现时,如未发现fra(X)或发现有一个fra(X)或发现有一个fra(X)时,应加大计数(成百增加)同时作相应的分子检查。Р4. 注意事项:Р4.1. 显带时间稍欠一点易辨出脆性位点。Р4.2. 注意无菌操作,严格执行无菌原则。Р4.3. 阳性标准:在显微镜下,可见X染色体Р4.4. 本实验方法为低叶酸培养双诱导的方法,比单纯的低叶酸培养效果好,提高了脆性X综合征的诊断效率。Р5. 实验用品及试剂:Р 超净工作台、酒精灯、烧杯、天平、低速离心机、恒温培养箱、、水浴箱、载玻片、玻片盒、光学显微镜、灭菌注射器(5 ml)、离心管、无菌吸管、量筒、移液器、染液缸、镊子、计时器、2.2mmol/L咖啡因、0.05mmol/L Frdu 、0.1mmol/L Frdu、5%小牛血清的
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