FSC/SSC 图的原则,在于能得到一独立离散的细胞族群,该Р 细胞群不与其它族群、细胞碎片有重迭现象。调整定位后,点击 Acquisition Р Control 窗口中的 Pause。Р Р Р Р FACS101 Handbook - 9 –Р易生物-领先的生物医药商务平台Р生物秀-专心做生物! Р Gating 圈选Р Р 细胞检品中,常含有大小不同、性质相异的细胞群体。我们常用前方散射与侧方散射Р 的二维位图,即散射光图谱(Scatter Plot),来圈选出不同细胞群的范围,选择性显Р 示出有意义的细胞群体,如下图圈选白血球之淋巴细胞族群。Р Р 16. 在工具板中选择多边形的 Region,在 FSC/SSC 散点图上划定淋巴细胞 R1 区域Р (如下图)。分析样品时,区域内细胞应会呈现成红色,可移动或改变形状来圈选Р 有意义的细胞。如果要删除 R1 区域,您可以在工具列中点选 Gates → Region Р list ,以鼠标点选 R1,再按 Delete 键删除 R1 区域。删除 R1 区域Р 后,可用绘图工具板,重画 R1。Р Р Р Р Р Р Р Р Р Р Р Р Р Р 17. 选取希望 Gate 的 FL1/FL2 散点图,从 Plots 菜单中选择 Format dot plot。在出现Р 的对话方框内,将 No Gate G1=R1。点击 OK。Р Р 调节 FL1、FL2 的探测器(电压) Р Р 18. 点击 Acquisition生物秀 Control 窗口中的 Restart。在 Detector/Amps 窗口中调节Р FL1、FL2 的电压,使 Negative ControlР 细胞群着落在所选直方图或散点图之Р 100--101 处。Р Р FACS101 Handbook - 10 –Р易生物-领先的生物医药商务平台
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