msbiology).SixE2yXPq5莇芅膈第二章遗传的物质基础-DNA莄羂羃教案目的:使学生了解并掌握DNA的结构与功能蒇蚆薁教案重点、难点:DNA的一级结构的测定,DNA的二级结构及超螺旋结构.袂螁芁课时安排:4学时薇肇蕿教案内容:薄蒀蚅DNA的一级结构薇蒈薄一、一级结构的构成羁薂莀所谓DNA的一级结构,就是指4种核苷酸的连接及其排列顺序,表示了该DNA分子的化学构成.核苷酸序列对DNA高级结构的形成有很大影响,如B-DNA中多聚<G-C)区易出现左手螺旋DNA<Z-DNA),而反向重复的DNA片段易出现发卡式结构等.6ewMyirQFL蚇蚄蚆一级结构的序列测定螃芁蒇目前所用的DNA测序方法是在末端终止法的基础上发展起来的.由英国科学家Sanger提出的.Sanger在生物大分子的序列测定方面做出了杰出贡献.他曾在1953年利用小片段重迭法成功测定了胰岛素51个氨基酸序列,并获得诺贝尔奖.1977年又利用末端终止法测定了FX174噬菌体得DNA序列,第二次获得诺贝尔奖.kavU42VRUs螇肅莃末端终止法又称为双脱氧法,基本原理是模拟体内DNA的复制过程在体外合成DNA,通过测定DNA片段的相对长度来推断核苷酸序列.y6v3ALoS89蒅肀蒀至于成分大家不要死记,可以回忆一下DNA复制过程需要哪几种组分:模板、dNTP、引物、DNA聚合酶,其中一种dNTP的磷酸基团用P32标记.除此之外还需要每个管中分别加入一种ddNTP.DDNTP是双脱氧核苷酸,由于在3¢位上缺少-OH,无法与下一个单体之间形成磷酸二酯键,因此,一旦掺入DNA链的延伸后,便终止DNA的合成这样,在DNA聚合酶的作用下核苷酸链不断延伸,我们可以调整dNTP和ddNTP的浓度,使ddNTP在每个位置上都有一个掺入的机会.每个管都会产生一系列长短不一的DNA片段,其共同特征是末端的最后一个碱基是相同的
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