到含有 Lac 操纵子 DNA 片段,其 P-O 区核苷酸序Р列已全部分析清楚,P 区是从 I 基因结束到 mRNA 转录起始位点,共长 82bp,O 区就是阻Р遏物结合区,位于 P 区后半部和转录起始区。把 mRNA 起始到结构基因起始密码子之间的Р序列称为前导区(Leader),P 区是从-82 ~ +1,阻遏物结合区大约从-7~ + 28。该区(-7~ + 28)Р 第 8 页Р的碱基序列有对称性,其对称轴在+11 位碱基对,P 区的 cAMP-CAP 复合物结合区(-67~ -52)Р也有一个对称区,其对称轴在-60~ -59 之间,对称区在蛋白质与 DNA 的识别和结合中有重Р要意义。Р 在反应体系中先加入阻遏物,后加入 RNA 聚合酶,体系无转录活性,反之若先加 RNAР聚合酶,后加阻遏物,体系有转录活性。已知 P—O 区有 7bp 重迭,很可能阻遏物与 O 区的Р结合影响了 RNA 聚合酶与 Pribnow 区紧密结合形成稳定的起始复合物,gal 操纵子的 P—OР区也是紧密相连并有重叠现象,面而 trp 操纵子的 O 区则完全在 P 区内。Р 教学环节五:课程教学的强化Р 需要强调的几个细节问题: 本节重难点回顾课堂练习Р(1)mRNA 合成的起始位点在操纵基因中,Р当阻遏物蛋白存在时,该位点被阻遏物占据。 1、乳糖操纵子的组成Р(2)若 RNA 聚合酶预先结合在启动子区域, 2、乳糖操纵子的负控诱导Р阻遏物无法与操纵基因结合。系统如下文,通过Р(3)cAMP-CAP 的结合位点非常接近于 RNA 3、乳糖操纵子的正转录调课堂练习加强Р聚合酶的作用位点,但不与之重合。控本节内容的强Р 化记忆和理Р(4)整个调节区域的长度为 115bp,约为 DNAР 解。Р螺旋的 12 圈。Р(5)这一区域的序列为 IPOZ,这个序列与遗Р传分析的结果相吻合。Р 第 9 页
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