分子化合物分开的方法。Р超滤法:应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液的目的。Р(二)丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀 4minР盐析(salt precipitation)是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,导致蛋白质沉淀。Р(三)电泳 4minР蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术, 称为电泳(electrophoresis) 。РSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于蛋白质分子量的测定。Р*等电聚焦电泳,通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。Р*双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。Р(四)层析 4minР蛋白质分离常用的层析方法Р* 离子交换层析:利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。Р* 凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析,利用各蛋白质分子大小不同分离。Р(五)超速离心 4minР超速离心法(ultracentrifugation)既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。Р通过对实验方法的介绍,使学生除掌握方法外,还应使学生明确在进行蛋白纯化工作中必须多种方法联合应用才能达到真正的纯化目的。Р三、多肽链中氨基酸序列分析 5minР以前用化学法费时费力现在运用自动化分析仪器Р四、蛋白质空间结构测定 5minР二级结构测定Р三级结构测定Р思考题或作业Р1.举例说明蛋白质的一级结构、空间结构与功能之间的关系?Р2.何谓蛋白质变性?变性与沉淀的关系如何?蛋白质变性原理有何应用价值?Р3.蛋白质纯化的方法哪几种?原理是什么?Р课后记Р本次课教学内容多,学生不易理解和消化,要求学生课后要进行自学和巩固。Р通过氨基酸和蛋白质理化性质的对比学习,使学生能更好地掌握相关知识。
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