即可。完成计数后再进行回收率计算,其中,试验组菌冋收率=(试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数)/菌液组平均菌落数×100%;稀释剂对照组菌冋收率=稀释剂对照组平均菌落数/菌液组平均菌落数×100%。最后再进行菌落计数法验证结果,上法分别进行3次平行试验,最终取每次回收率均不低于70%的最简方法作为头孢丙烯原料药的菌落计数方法,结果显示,细菌计数宜采用低速离心-薄膜过滤-酶中和联用法,霉菌与酵母菌宜采用平皿法。2.4控制菌检查法的验证分别取3批样品并制成1:10供试液各10mL与10〜lOOcfu试验菌。①培养基稀释法:取制得的样品加入到火菌锥形瓶中,并分别在尝试加入300或500mL胆盐乳糖培养基;②低速离心沉淀-薄膜过滤法:同2.3项中进行细菌计数并制备薄膜,并放哪购入含100mL胆盐乳糖的火菌瓶中;③低速离心沉淀-薄膜过滤-酶中和联用法:同样照上法进行细菌计数;④制备薄膜,放入含100mL(含50万单位头孢菌素酶)胆盐乳糖火菌瓶中。照上述方法所制得的薄膜均置于35°C条件下培养18〜24h,最后再进行MUG试验与錠基质试验。试验结果显示,三个批次样品均在采用低速离心沉淀-薄膜过滤-酶中和联用法时的效果最优,试验组冇检出人肠埃希菌,故认为可按此法进行头孢丙烯原料的控制菌检查。3结论本试验通过对5种试验菌,3批次样品分别进行3次平行实验的冋收率方法学验证与控制菌方法验证,结果提示,对头孢丙烯原料的微生物限度检查法而言,应采用低速离心-薄膜过滤-酶中和联用法进行其细菌计数及控制菌检查,而霉菌与酵母菌计数则应采用平皿法。参考文献[2】姚华,潘庭峰.2种原料药微生物限度检查方法验证[j].淮海医药,2012,30(6):541-542.[3】潘强,白旭东.罗红霉素缓释颗粒微生物限度检验方法的探讨[」].中国药事,2009,23(8):804-806.
全文预览
