子结构的设计②突变基因碱基序列的确定③突变基因的获得④新酶的获得7.核苷酸置换修饰◆将酶分子核苷酸链上的某一个核苷酸换成另一个核苷酸的修饰方法,称为核苷酸置换修饰。◆核苷酸置换修饰通常采用定位突变技术进行。只要将核苷酸链中的一个几个核苷酸置换,就可以使核酸类酶的特性和功能发生改变。◆L-19IVS活性中心由第22~27位的六个核苷酸残基组成,只要将其中的碱基置换一个,就可以使其底物专一性发生改变(参看表5-2)。表5-2L-19IVS活性中心上碱基的改变引起其底物专一性的变化L-19IVS22~27位的核苷酸序列底物IⅡ催化产物5’-GGAGGG-3’UCUAAAAA(1)UGUAAAAA(2)GCUAAAAA(3)UCU+GAAAAA无反应无反应5’-GCAGGG-3’UGU+GAAAAA无反应5’-GGCGGG-3’GCU+GAAAAA8.酶分子的物理修饰◆通过各种物理方法使酶分子的空间构象发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的方法称为酶分子的物理修饰。◆酶分子物理修饰的特点在于不改变酶的组成单位及其基团,酶分子中的共价键不发生改变。只是在物理因素的作用下,副键发生某些变化和重排,使酶分子的空间构象发生某些改变。◆酶分子的空间构象的改变还可以在某些变性剂的作用下,首先使酶分子原有的空间构象破坏,然后在不同的物理条件下,使酶分子重新构建新的空间构象。9.酶分子修饰的应用9.1在酶学研究方面的应用:(1)酶的活性中心研究:(2)酶的空间结构研究:(3)酶的作用机制研究:9.2在医药方面的应用:(1)降低或者消除酶抗原性:(2)增强医药用酶的稳定性:9.3在工业方面的应用:(1)提高工业用酶的活力:(2)增强工业用酶的稳定性:(3)改变酶的动力学特性:9.4在抗体酶(abzyme)研究开发方面的应用:9.5在核酸类酶人工改造方面的应用:9.6在有机介质酶催化反应中的应用:
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