酶学分析技术

能高效催化特异生化反应的蛋白质,属于生物催化剂酶的特点:酶活性的检测、代谢物的酶学分析和同工酶及亚型测定用于临床诊断和疗效判断3主要内容:?酶学分析基本知识?酶活性测定方法?代谢物酶学分析技术?同工酶分析?诊断酶学在临床中的应用4?掌握酶活性单位的表示方法与计算、酶活性测定的定时法与连续监测法、代谢物的酶法测定。?熟悉酶促反应进程、酶促反应动力学、酶活性测定的直接法与间接法、酶活性测定的影响因素。?了解同工酶产生的机理与测定方法、酶活性单位的校准、工具酶的应用。教学要求:5简介内容:一、酶的结构和分类二、酶活性和酶的活性单位三、酶促反应进程四、酶促反应动力学第一节酶学分析基本知识6一、酶的结构和分类酶是由活细胞合成的、对其特异性底物起高效催化作用的蛋白质。是机体内催化各种代谢反应最主要的催化剂。7(一)单纯酶完全由蛋白质组成(二)结合酶蛋白质和非蛋白质(辅助因子)结合酶= 酶蛋白+ 辅助因子8辅助因子分类(按其与酶蛋白结合的紧密程度)辅酶(coenzyme):与酶蛋白结合疏松,可用透析或超滤的方法除去。辅基(prosthetic group):与酶蛋白结合紧密,不能用透析或超滤的方法除去。9?定义:酶活性(enzyme activity)也称为酶活力,表示酶催化底物的能力,一般用酶促反应速度来表示,即规定条件下在单位时间内产物的生成量或底物的减少量。?表示方法:dtPdv][?或 dtSdv][??v:反应速率,[P ]:产物浓度,t:时间,[S]:底物浓度。(一)酶活性二、酶活性及酶的活性单位酶活性的高低如何衡量?10酶是极微量的蛋白质,临床化学检验难以直接测定酶蛋白的绝对含量。因为酶是一类催化效率极高的生物催化剂,微量的酶可以催化大量的底物而发生化学反应,所以临床以酶的活性测定来取代酶的含量测定,以酶活性单位来间接表示酶的浓度大小。(二)酶活性单位什么是酶活性单位?