进的方式进行切片,良好的切片将在放卷板下方形成一张完整平坦无褶的薄片,若切片略有弯曲可用小毛笔轻轻展平。?9.打开放卷板,用载玻片平稳的轻压组织,使其平整的吸附到载玻片上。Р冰冻切片技术原理Р2021/1/14Р6РР四、冷冻切片的制作方法Р10.也可不使用放卷板,用毛笔轻带组织下方的白边(OCT),随机器的慢慢转动,用毛笔轻轻从上至下展开组织,使其平坦,组织齐全满意时,用毛笔轻轻压住切片的下方,右手拿载玻片轻轻平稳地压组织,使其平整地吸附在载玻片上,迅速放入固定液,进入染色程序。?11.正确地调整使用冷冻切片机的放卷板是获得平展完整冷冻切片的重要手段,放卷板的正确位置是,与切片刀的刀刃平行并略微突出于刀刃。Р冰冻切片技术原理Р2021/1/14Р7РР五、冷冻切片的固定和染色Р一、冷冻切片的固定、固定液的选择?1.丙酮液?2.10%中性福尔马林缓冲液?3.95%酒精?4.乙醚、纯酒精等量混合固定液?5.AF液?6.AFA液?可根据工作要求选择适合于本单位的固定液Р冰冻切片技术原理Р2021/1/14Р8РР五、冷冻切片的固定和染色Р二、冷冻切片染色?1.冷冻切片应立即放入固定液中。?2.固定1min左右,水洗。?3.入苏木精染色2min,水洗。?4.1%盐酸酒精分化数秒,水洗。(0.5%氢氧化铵水溶液返蓝数秒,水洗)?5.伊红染液20s-1min,水洗。?6.70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇逐级脱水。?7.无水乙醇脱水2次。?8.二甲苯透明两次。?9.中性树胶封固。Р冰冻切片技术原理Р2021/1/14Р9РР六、冷冻切片的标准及染色的注意事项Р一、冷冻切片的标准?1.操作正确?2.切片完整?3.厚薄均匀?4.无褶无刀痕?5.组织内无冰晶?6.核质分明,染色适度?7.组织结构清晰?8.脱水透明洁净?9.封裱美观?10.时间迅速Р冰冻切片技术原理Р2021/1/14Р10