Р急Р患者在手术台等候,临床需要病理科结果做决策Р病理技术人员制片的流畅Р病理诊断医生精确的诊断Р为了降低快速病理诊断的风险,保证其准确?性,技术人员必须保证作出一张合格的冰冻?切片。Р何为术中快速冰冻切片?Р采用物理降温方法将组织迅速冷冻后切成薄?片的过程,再经过固定、苏木精-伊红染色、?封片,显微镜镜检。Р合格的冰冻切片?Р细胞结构清晰、无人为退变Р操作流程规范Р染色核浆分明、红蓝适度Р切片完整、厚薄均匀、?无皱褶、无刀痕、无冰晶Р合格切片应?具备的因素Р一、规范的制片操作?1、取材的厚度?2、包埋剂量、冷冻速度?3、切片熟练程度?4、固定及时、染色清晰Р二、合格的试剂及染液?1、固定液类型?2、苏木精及伊红染液类型Р取材后组织迅速放置于冷冻切片机速冻台上的标本托(标本托在放置组织之前加适量包埋剂),添加包埋剂,待组织冷冻住1/3后放上冷冻锤。Р速冻Р将冻好的组织移到切片机夹头内夹紧,修片至适度面,即可切片,切好的组织薄片(4-6um),黏贴在编号的载玻片后立即放入固定液(95%乙醇)固定30s-1min。Р切片Р1.自来水稍洗;2.改良Carazzi苏木精染色50s-1min);3.稍水洗,碳酸锂水溶液蓝化15s;4.1%水溶性伊红染色20s;5.稍水洗。Р染色Р1.80%酒精、95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ逐级脱水;2.二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ?透明;3.中性树胶封固,贴附标签。Р封固Р冰冻切片染色流程Р冰冻切片质量的影响因素及分析Р一、取材?(1-1.5)cm X(1-1.5)cm X 0.4cm?骨组织、钙化组织不做冰冻切片?组织会过厚延长冷冻速度、易出现冰晶?组织必须是新鲜未固定(特别是乙醇)Р二、包埋?大多数采用OCT,也可用普通胶水。?胶水太稀,会延长冷冻时间,胶水太稠,标?本与样本头容易脱开且易粘附于玻片上不容?易洗掉,过多易影响冷冻速度。
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