第十章_转基因技术及应用

第十章转基因技术与应用转基因植物转基因动物转基因微生物转基因技术是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中,由于导入基因的表达,引起生物体的性状的可遗传的修饰,这一技术称之为转基因技术(echnology)。人们常说的"遗传工程"、"基因工程"、"遗传转化"均为转基因的同义词。第一节转基因植物p85目的基因和受体的获得转基因方法转基因植物的鉴定转基因植物的应用转基因植物研究存在的问题一、目的基因的来源采用限制性内切酶,从生物组织中获取目的基因;通过mRNA合成cDNA;人工合成的DNA片段;聚合酶链式反应(PCR)扩增特定基因片段。二、转基因植物受体包括:叶盘、胚轴、茎尖、茎段原生质体悬浮细胞愈伤组织胚状体活体三、转基因方法直接导入法物理法:基因枪法、电击法、超声法、显微注射法、激光微束法化学法:PEG法,脂质包埋法等载体介导法:农杆菌介导、病毒介导法花粉管通道法枪击法将待转化的DNA沉淀在细小金属珠的表面,用特制枪将金属珠直接打入植物细胞,枪的威力为430m/s,植物细胞通常是胚胎细胞、玉米籽、叶子等,但进去的DNA片段整合效率极低。电击法将高浓度的质粒DNA加入到植物细胞的原生质体悬浮液中,混合物在200-600V/cm的电场中处理若干秒钟,然后将原生质体在组织培养基中生长1-2周,再生出整株植物。直接导入法融合法将外源DNA与特殊的疏水性高分子化合物混合,在水中这些疏水性化合物分子形成球状的脂质体,后者与植物细胞原生质体融合,筛选融合子,再生植物细胞壁。T-DNA的染色体整合机制载体介导法农杆菌介导法p87共整合转化程序