源DNA片段与载体连接后形成的杂种DNA分子称为重组DNA分子?重组DNA导入宿主细胞,在宿主细胞内重组DNA分子复制,产生大量相同拷贝的重组DNA分子,称为克隆?克隆的DNA分子可以从宿主细胞中回收,纯化?克隆的DNA可以转录和翻译,其产品可以被分离出来用于研究或商业开发Р二、转基因育种? 将植物遗传转化和常规育种技术相结合,?培育具有特定目标性状的植物新品种。Р转基因育种技术的一般实验流程Р目的基因的克隆与鉴定Р转化载体的构建РE.Coli转化,质粒?抽提与鉴定Р农杆菌的转化与活化Р外植体制备Р浸染Р选择培养Р共培养Р移栽Р继代繁殖Р分子检测Р生理检测Р纯化Р第二,传统技术是在生物个体水平上进行,操作对象是整个基因组,所转移的是大量的基因,不可能准确地对某个基因进行操作和选择,对后代的表现预见性较差。? 转基因技术转移的是经过明确定义的基因,功能清楚,后代表现可准确预期,因此,转基因技术是对传统技术的发展和补充。Р将两者紧密结合,可相得益彰,提高作物品种遗传改良的效率。Р第二节目的基因的获得? 根据获得基因的途径主要可以分为两大类:? 根据基因表达的产物—蛋白进行基因克隆;? 从基因组DNA或mRNA序列克隆基因。Р根据基因表达的产物—蛋白进行基因克隆? 主要步骤如下:Р利用这种方法人类首次人工合成了胰岛素基因。?虽然在早期采用这种方式已经成功地克隆了许多基因。?局限性:兼并密码子? 效率低? 未知基因及产物Р分离蛋白质Р明确氨基酸序列Р推导核苷酸序列Р人工合成Р第三节植物遗传转化的受体系统Р受体:是指用于接受外源DNA的转化材料。?受体系统:是指用于基因转化的外植体通过细胞或其? 他组织培养途径,能高效、稳定地再生无性? 系,并能接受外源DNA整合、转化选择对抗? 生素敏感的再生系统。?转化的主要目的:外源DNA稳定地插入植物细胞的染? 色体组中,并再生出完整的植株。
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