荧光素&流式技术

荧光素&流式细胞术杨培2014.02.11荧光素介绍流式细胞术基本原理流式细胞术的应用流式胞内因子的流式检测流式多色Panel设计主要内容一.荧光素介绍荧光素(Fluorescein)是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多。荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光素介绍荧光素的激发和发射光谱任何发荧光的物质分子都具有这两个特征光谱(nm)激发光谱(Excitation,Ex):是指能特异性地激发某种荧光素的一定波长范围内的光线,也称为吸收光谱。吸收波峰(最大吸收波长):Ex-Max发射光谱(Emission):是指某一波长激发光引起荧光素发射的一定波长范围内的荧光发射波峰(最大发射波长):Em-Max荧光素的使用:选择正确的激光器确定所需荧光探测器(PMT)488nm520nm异硫氰酸荧光素(FITC)荧光素介绍Blue(488nm)FITCAlexaFluor488PEPerCPPerCP-Cy5.5PE-Cy5PE-Cy7PI7-AADRed(633nm)APCAPC-Cy7AF647AF700Violet(405nm)AmCyanBrilliantViolet421PacificBlueBrilliantViolet510BrilliantViolet570BrilliantViolet605BrilliantViolet650BrilliantViolet711BrilliantViolet785Qdot605UV(360nm)DAPI常用荧光素荧光素介绍第二步:荧光素的选择荧光素光谱分析网络工具:ctraanalyzer荧光素介绍